Актуальность. Одним из основных механизмов многих патологических процессов является дисбаланс синтеза цитокинов. При этом известно, что ряд растений семейства Angelica регулируют синтез цитокинов и с древности используются для лечения, в частности, аутоиммунных заболеваний.
Цель. Провести тестирование экстракта Дудника Амурского (Angelica Amurensis) в отношении NFAT5-опосредованного механизма регуляции синтеза цитокинов.
Материал и методы. В качестве исходного сырья использовали корни и траву Дудника Амурского (Angеlica Аmurеnsis). Экстрагирование материала осуществляли с помощью комбинации методов погружной ультразвуковой экстракции в водно-спиртовом растворе и ускоренной экстракции этанолом ASE (Accelerated solvent extraction). Производили исследование спонтанной и индуцированной фитогемагглютинином (ФГА) продукции GM-CSF, IFNγ, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, TNFα мононуклеарными клетками периферической крови 17 здоровых доноров. Анализ проведен методом цитометрических бус Bio-Plex ProTM Human Cytokine Grp I Panel 8-plex (Bio-RAD).
Параллельно определяли уровень NFAT5 (ядерный фактор активированных Т-клеток) в клеточном лизате с помощью тест-системы Cusabio Biotech для иммуноферментного анализа (Human Nuclear factor of activated T-cells 5(NFAT5) ELISA kit). Исследования выполняли по протоколам производителей.
Результаты. Установлено, что использованный экстракт не оказывал достоверного влияния на спонтанную продукцию изучаемых цитокинов (опыт/контроль пг/мл): GM- CSF - 15,2±3,5/10,2±0,3; IFNγ - 0,3±0,9/0,7±0,4; IL-2 - 15,2±0,1/22,2±1,2; IL-4 - 3,4±0,4/3,08±0,09; IL-6 - 185,3±7,9/227,9±49,2; IL-8 - 91,4±11,2/69,4±17,8; IL-10 – 37,3±12,4/44,3±21,2; TNFα 105±12,3/115,8±11,3 (р˃0,05). Однако, он обладал выраженным ингибирующим эффектом в отношении ФГА стимулированного синтеза следующих цитокинов (экстракт/ФГА пг/мл): IFNγ – 344,9±26,2/1606,5±82,7; IL-2 - 22,2±1,2/50,2±4,3; IL-6 - 145,3±14,9/227,9±10,2; IL-8 - 69,4±7,8/362,5±2,8, TNFα - 115,8±1,3/938±23 (р≤0,01). Также отмечено достоверное снижение концентрации NFAT5 в лизатах предобработанных экстрактом мононуклеарных клеток (более, чем на 72,3%; р≤0,001). Поскольку NFAT5 является важнейшим звеном процесса синтеза провоспалительных цитокинов, можно с уверенностью предположить, что иммуномодулирующее действие полученного экстракта связано с ингибицией NFAT5.
Выводы. Полученные данные указывают на высокую перспективность использования экстракта Дудника Амурского в качестве фармацевтической субстанции.
