В настоящее время наблюдается рост распространенности аутоиммунных заболеваний, которые поражают 5—7% населения земного шара. Согласно современным представлениям, ишемическая болезнь сердца (ИБС) не является аутоиммунным заболеванием. Однако в последние десятилетия появились сообщения об исследовании аутоиммунных процессов при этом заболевании, в частности, при стенокардии напряжения (СН) и остром инфаркте миокарда (ОИМ) [1]. Полученные в последние годы данные об иммунологических аспектах атеросклероза позволили сформировать аутоиммунную теорию патогенеза этого заболевания, которая основывается на доказательствах непосредственного угнетения аутоиммунных механизмов в развитии экспериментального атеросклероза [2]. Клинико-иммунологические исследования у пациентов с ИБС определили роль иммунных комплексов (ИК) в возникновении и развитии атеросклероза и сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ). Наличие ИК в крови больных ИБС приводит к увеличению активности тромбоцитов и повышению уровня циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), которые обусловливают высокую степень их влияния на агрегацию тромбоцитов [3, 4].
Известно, что ИК образуются в результате связывания и уничтожения различных антигенов: бактерий, вирусов, опухолевых клеток и др. В организме существует регуляция между образованием ИК и их элиминацией фагоцитами при участии активированной ЦИК системы комплемента по классическому пути [5]. ЦИК, содержащие холестерин (ХС) и другие антигены, фиксируются на эндотелии и вызывают его повреждение. Начинается выход различных клеток и факторов воспаления из кровяного русла в миокард. При этом разрушаются мембраны кардиомиоцитов, находящихся в стадии потенциально обратимых метаболических изменений, что усугубляет повреждение миокарда [6]. Наряду с фагоцитозом элиминация ИК происходит при связывании их эритроцитами через рецепторы CR-1 с участием белков системы комплемента [7].
На поверхности мембраны эритроцита находятся центры связывания биологически активных веществ, таких как инсулин, соматотропный гормон, простагландины, липопротеиды, что свидетельствует об их участии в передаче сигналов, поступающих из организма [3, 8]. Происходят образование аутоантител на антигенные липопротеид-антитела, фиксация аутоиммунных комплексов на эритроцитах и затем захват этих эритроцитов фагоцитами [9, 10].
Исходя из изложенного мы сделали вывод, что иммунные повреждения эндотелия можно косвенно подтвердить, изучая реакцию эритрофагоцитоза (ЭФ). Наша гипотеза заключалась в том, что эритроциты, нагруженные через комплемент ИК, будут поглощены сегментоядерными нейтрофилами в реакции ЭФ.
Цель работы: изучить процессы ЭФ как иммунологического маркера аутоиммунных реакций у женщин с ИБС.
Материал и методы
В исследование включены 46 женщин с ИБС в возрасте 30—59 лет (в среднем 52,4±2,3 года) в различные физиологические периоды женского организма — с сохраненным менструальным циклом (21 пациентка) и находящихся в менопаузе (25 пациенток). Из группы эпидемиологического обследования отобраны 23 женщины и 23 — из группы клинического обследования, находившихся на стационарном и амбулаторном лечении.
Контрольную группу составили 10 практически здоровых женщин аналогичного возраста, 5 из которых были в репродуктивном периоде и 5 в менопаузе.
Следует отметить, что среди 23 обследованных клинической группы у 16 женщин, поступивших на стационарное лечение, был острый коронарный синдром, из них у 10 развился инфаркт миокарда (ИМ) с подъемом сегмента ST, а у 6 — ИМ без подъема сегмента ST. У остальных 7, наблюдавшихся амбулаторно, выявлена СН. Среди 23 женщин эпидемиологической группы у 14 была СН, а 9 страдали различными видами нарушения ритма.
У всех обследованных исследовали липидный состав крови, а также брали образцы крови для выявления ЭФ.
В пробирку помещали 10 мг оксалата натрия и 10 мл венозной крови, тщательно перемешивали и оставляли стоять 1—1,5 ч. Далее кровь перемешивали в течение 30 мин, после чего отстаивали в течение 1 ч при комнатной температуре до разделения слоев, а из осадка готовили мазки. При морфологическом исследовании лейкоконцентрата выявляли процент ЭФ сегментоядерными нейтрофилами на 1000 лейкоцитов.
Полученные в процессе исследования данные обрабатывали с помощью пакетов прикладных программ SAS и Statistica. Средние величины рассчитывали с помощью параметрического t-критерия Стьюдента. Корреляции изучали с помощью коэффициента корреляции Пирсона. Различия считали статистически значимыми при p<0,05.
Результаты и обсуждение
Полученные данные о реакции ЭФ в крови у пациенток 1-й и 2-й групп в целом и отдельно в репродуктивном возрасте и в менопаузе представлены в таблице.
У 10 практически здоровых лиц уровень ЭФ составил в среднем 0,8% при наличии его в 8 нейтрофилах на 1000 лейкоцитов. Наиболее высокий ЭФ наблюдался у амбулаторных больных с ИБС — в среднем 11,7% (2,4— 20%), т.е. в 117 нейтрофилах на 1000 лейкоцитов отмечалась морфологическая картина ЭФ нейтрофилами, что свидетельствует о выраженной аутоиммунной реакции у больных ИБС. У обследованных с острым ИМ ЭФ в среднем составил 9,6% (5,2—15%), что в 1,2 раза меньше, чем у больных со стенокардией. Относительно невысокий ЭФ в сыворотке крови больных ИМ связан, на наш взгляд, с фазностью аутоиммунного процесса, а также с их большей фиксацией на тканях, чем в свободном виде в циркулирующей крови.
Следует отметить, что у женщин с ИБС, как при острых, так и при хронических формах наблюдается почти 10-кратное увеличение ЭФ (9,6 и 11,7% соответственно) по сравнению с контрольной группой здоровых лиц, у которых ЭФ в среднем составил лишь 0,8% (p<0,001).
Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что морфологическую картину ЭФ можно использовать как лабораторный тест для выявления аутоиммунного компонента у больных ИБС как при острых, так и хронических формах.
Предварительные данные позволяют предположить, что увеличение ЭФ более 1% может служить иммунологическим маркером ИБС. Однако необходимо продолжить исследования, результаты которых позволили бы предложить нормативные данные, с наибольшей вероятностью подтверждающие иммунное повреждение миокарда у женщин с ИБС. При анализе иммунных реакций в разные физиологические периоды женского организма относительно высокий ЭФ отмечен у амбулаторных больных ИБС в период менопаузы, составляя 13,2±1,3% (p<0,001), т.е. в 132 нейтрофилах на 1000 лейкоцитов произошла реакция ЭФ нейтрофилами. Это свидетельствует о нагруженности эритроцитов ИК и выраженной аутоиммунной реакции. У фертильных женщин 1-й группы средний ЭФ составил 10,7±1,3% (2,4—20%), что сравнительно ниже, чем у женщин с менопаузой — 11,2±0,9 (8—20%). Во 2-й группе наблюдалась та же закономерность: у фертильных женщин отмечались меньшие значения ЭФ (12,7±1,4%) по сравнению с таковыми у женщин в менопаузе (13,2±1,3%).
Фундаментальные исследования, выполненные в последние годы, свидетельствуют о существенной роли нарушений липидного состава крови у больных ИБС. Хорошо изучена роль гиперхолестеринемии, повышения концентрации в крови ХС липопротеидов низкой (ЛНП) и очень низкой плотности, снижения концентрации ХС липопротеидов высокой плотности (ЛВП) в возникновении и поддержании воспалительного процесса. Модифицированные ЛНП — потенциально провоспалительные факторы, которые являются важной причиной повреждения эндотелия. ХС ЛВП, напротив, проявляют себя как противовоспалительные факторы. Их дисбаланс приводит к прогрессированию тяжести атеросклеротического процесса [11].
В наших исследованиях сопоставление данных уровней ХС ЛНП в сыворотке крови у больных ИБС показало, что у женщин 1-й и 2-й групп в период менопаузы отмечается более высокий уровень этих липопротеидов (3,03±0,4 и 3,4±0,2 ммоль/л соответственно).
Основываясь на предположении, что в реакции ЭФ фракции ХС ЛНП играют определяющую роль, мы провели корреляционный анализ между исследуемыми параметрами. Анализ взаимосвязи уровня ЭФ и ХС ЛНП в крови у фертильных женщин с ИБС выявил прямую зависимость между выраженностью аутоиммунных реакций с липидами: коэффициент корреляции Пирсона (r) в 1-й группе у фертильных женщин составил +0,5, а во 2-й группе +0,69. У пациенток с менопаузой положительная взаимосвязь была выше, и коэффициент корреляции составил в 1-й группе +0,61, а во 2-й группе +0,8. Эти данные подтверждают патогенетически значимую роль ХС ЛНП в аутоиммунных реакциях, в частности ЭФ, в развитии ИБС у женщин.
Таким образом, реакция ЭФ является одним из методов, определяющих аутоиммунный компонент у женщин с ИБС. Повышенный ЭФ у женщин 1-й и 2-й групп взаимосвязан с увеличением в крови содержания ХС ЛНП, причем в большей степени эта зависимость проявляется в период менопаузы.
Заключение
Для выявления аутоиммунного компонента ИБС в качестве лабораторного теста следует изучать морфологическую картину ЭФ, учитывая при этом, что у женщин с ИБС наблюдается почти 10-кратное увеличение ЭФ по сравнению с таковым у здоровых лиц. Проведенное исследование продемонстрировало, что увеличение ЭФ у женщин с ИБС подтверждает иммунологическое повреждение миокарда у лиц как с острым коронарным синдромом, так и СН, причем этот процесс взаимосвязан с повышением уровня ХС ЛНП.
Иммунологические методы исследования позволяют повысить качество диагностики заболеваний у пациентов с ССЗ, в частности, определение ЭФ может служить иммунологическим маркером как острых, так и хронических форм ИБС.
Выводы
- У женщин с ишемической болезнью сердца по сравнению со здоровыми лицами наблюдается почти 10-кратное увеличение эритрофагоцитоза.
- Повышенный эритрофагоцитоз у женщин взаимосвязан с увеличением в крови содержания холестерина липопротеидов низкой плотности, причем в большей степени эта зависимость проявляется в период менопаузы — (r=+0,61 в 1-й группе, r=+0,8 во 2-й группе).
